- 觀點1： 酶免疫技術在食品檢測中的應用目前食品受農藥、獸藥污染的問題仍比較嚴重，給人們的身體健康帶來了危害，盡管國家和政府對此已做了大量的工作，投入了人力、物力，但執(zhí)行情況仍不盡如人意。其主要原因之一就是缺乏快速、靈敏、簡便的檢測方法，相關的檢測試劑研發(fā)速度太慢。免疫分析技術如酶聯(lián)免疫分析法、膠體全免疫層析試紙法是一種快速、靈敏、簡便的分析方法，在國外已被用于食品安全檢測，我國也已在臨床檢驗中應用多年。酶免疫測定具有高度的敏感性和特異性，幾乎所有的可溶性抗原抗體系統(tǒng)均可用以檢測。它的最小可測值達ng甚至pg水平。與放射免疫分析相比，酶免疫測定的優(yōu)點是標記試劑比較穩(wěn)定，且無放射性危害。因此，酶免疫測定的應用日新月異，酶免疫測定的新方法、新技術不斷發(fā)展。但酶免疫測定在食品檢測中的應用，應歸功于商品試劑盒和自動或半自動檢測儀器的問世。酶免疫測定步驟復雜，試劑制備困難。只有用符合要求的試劑和標準化的操作，才能獲得滿意的結果。商品ELISA試劑盒中應包含包被好的固相載體、酶結合底物和洗滌液等。先進的試劑盒不僅提供全部試劑成分，而且所有試劑均已配制成應用液，并在各種試劑中加色素，使之呈現(xiàn)不同的顏色。ELISA操作步驟多，所需試劑也多，這種有色試劑既方便操作又有利于減少操作錯誤。ELISA所有儀器除定量測定中必須的出色儀（專用的稱為ELISA測讀儀）外，洗滌板也極有用。洗滌機的使用不僅省時省工，而且也有利于操作標準化，對中小實驗室是實用且易于接受的。但應注意在采用洗板機前，應先對洗板機的性能加以檢定，確認各孔的洗滌效果是否徹底，且重復性好。自動化和半自動化ELISA分析儀亦趨成熟，并在大中型臨床檢驗實驗室中取得應用。自動化ELISA分析儀有開放系統(tǒng)（Opensystem）和封閉系統(tǒng)（Closesystem）兩類。前者適用于所有的96孔板的ELISA測定；后者只與特定試劑配套使用。1 用于細菌及毒素、真菌及毒素、病毒和寄生蟲的檢測如沙門氏菌、單核細胞增生李斯特菌、鏈球菌、結核分枝桿菌、布氏桿菌、金黃色葡萄球菌腸毒素、黃曲霉毒素等。肝炎病毒、風疹病毒、皰疹病毒、輪狀病毒等；寄生蟲如弓形蟲、阿米巴、瘧原蟲等。2 用于蛋白質、激素、其他生理活性物質、藥物殘留、抗生素等的檢測近年來有關使用酶免疫法測定乳和血漿中有機化學殘留物已有報道，這標志著本法在動物性食品衛(wèi)生監(jiān)測方面具有新的應用趨勢。因其優(yōu)點，該法已引起了世界各國的重視，并已著手這方面的研究。但是，該法在動物性食品衛(wèi)生監(jiān)測中還存在著許多問題，不過，前景還是廣闊的。世界衛(wèi)生組織（WHO）和世界糧農組織（FAO）對這方面的研究給予了許多支持。只要對實際問題進行細致的科學研究并努力追求改進的方法，酶免疫法定會有新的姿態(tài)在食品衛(wèi)生監(jiān)測領域出現(xiàn)。標準化、商品化的酶免疫試劑盒將會問世，也將給整個食品衛(wèi)生事業(yè)帶來新的前景。目前藥物殘留免疫分析技術主要分為兩大類：以為相對獨立的分析方法，即免疫測定法（Immuno Assays,IAs）,如RIA、ELISA、固相免疫傳感器（Soindphase immunosensor）等；二是將免疫分析技術與常規(guī)理化分析技術聯(lián)用，如利用免疫分析的高選擇性作為理化測定技術中的凈化手段，典型的方式為免疫親和色譜(Immuno Affinity Chromatogrphy,IAC)。與常規(guī)的理化分析技術相比，免疫分析技術最突出的優(yōu)點[5]是操作簡單，速度快、分析成本低。以使用微量滴板的ELISA為例，免疫測定法取樣量小，前處理簡單、容量大，儀器化程度低，檢測奶與GC/MS或GC/ECD相似，可方便地達到ng/g～pg/g級，分析效率則為HPLC或GC的幾十倍。目前大部分抗生素已經建立了免疫測定法，如硫胺二甲基嘧啶、氯霉素、沙拉沙星、鏈霉素、四環(huán)素、魔能霉素等。免疫分析能與其他技術聯(lián)用。在聯(lián)用方法中，免疫分析技術既可作為HPLC或GC等測定技術的樣品凈化或分離手段，如IAC/HPLIAC/GC、HOIAC/HPLC；也可作為其離線或在線檢測方法，如HPLC/IA,TLC/IA,CZE/IA,SFC/IA,FIA/IA等，這些方法結合了免疫分析的選擇性、靈敏度與HPLC、GC等技術的高速、高效分離和準確檢測能力，使分析過程簡化、分析成本下降，拓展了待測物范圍。在HPLC/IA等分析中，IA一般作為離線檢測方法；又稱免疫圖譜法（Immunograms），適用于液相檢測器無響應或分離困難的殘留組分的檢測。FIA/IA可以實現(xiàn)IA的動態(tài)、實時和自動檢測，分析速度快，已發(fā)展為一種專門的免疫檢測技術---FIIA。ELISA試劑盒是目前奶牛場和牛奶公司使用最廣泛、快速、靈敏的檢測抗生素殘留的方法。各類抗生素試劑盒為國外生產，這使得國內的奶及奶制品公司花費較大。如德國拜發(fā)公司生產的抗生素檢測試劑盒，一個96次檢測試劑盒要花3800元，每個樣品的檢測要花30～50元。對一家中小型奶制品企業(yè)而言，每年在抗生素等藥物的檢測上要花費20萬元以上。因此很有必要研制和開發(fā)出國產的試劑盒，以降低成本，提高經濟效益。3 應用實例以ELISA法檢測致瀉性大腸埃希氏腸毒素為例，說明ELISA在食品檢驗中的應用。（1） 產毒培養(yǎng) 將菌株和陽性及陰性對照菌株分別接種于0.6mLCAYE培養(yǎng)基內，37℃振蕩培養(yǎng)過夜。加入20000IU/mL的多粘菌素B0.05mL，于37℃，離心1h，分離上清液，加入0.1%硫柳貢0.05mL，于4℃保存待用。（2） LT檢驗方法（雙抗體夾心法）① 包被：先在產腸毒素大腸埃希氏菌LT和ST酶標診斷試劑盒中取出包被用LT抗體管，加入包被液0.5mL，混勻后全部吸出于3.6mL包被液中混勻，以每孔100μL量加入到40孔聚苯乙烯硬反應板中，第一孔留空作對照，于4℃冰箱濕盒中過夜。② 洗板：將孔中溶液甩去，用洗滌液I洗3次，甩盡液體，翻轉反應板，在吸水紙上拍打，去盡孔中殘留液體。③ 封閉：每孔加100μL封閉液，于37℃水浴中1h。④ 洗板：用洗滌液II洗3次，操作同上。⑤ 加樣品：每孔分別加各種試驗菌株產毒培養(yǎng)液100μL，37℃水浴中1h。⑥ 洗板：用洗滌液II洗3次，操作同上。⑦ 加酶標抗體：先在酶標LT抗體管中加0.5mL稀釋液，混勻后全部吸出于3.6mL稀釋液中混勻，每孔加100μL，37℃水浴中1h。⑧ 洗板：用洗滌液II洗3次，操作同上。⑨ 酶底物反應：每孔（包括第一孔）各加基質液100μL，室溫下避光作用5～10min，加入終止液50μL。⑩ 結果判定：以酶標儀在波長492nm測定吸光度OD值，待測標本OD值大于3倍以上為陽性，目測顏色為橘黃色或明顯高于陰性對照為陽性。（3） ST檢測方法（抗原競爭法）① 包被：先在包被用ST抗原管中加0.5mL包被液，混勻后全部吸出于1.6mL包被液中混勻，以每孔50μL加入于40孔聚苯乙烯軟反應板中，加液后輕輕敲板，使液體布滿孔底。第一孔留空作對照，于4℃冰箱濕盒中過夜。② 洗板：用洗滌液I洗3次，操作同上。③ 封閉：每孔加100μL封閉液，于37℃水浴中1h。④ 洗板：用洗滌液II洗3次，操作同上。⑤ 加樣品及ST單克隆抗體：每孔分別加各實驗菌株產毒培養(yǎng)液50μL，稀釋的單克隆抗體50μL（先在ST單克隆抗體管中加0.5mL稀釋液，混勻后全部吸出于1.6mL稀釋液中，混勻備用），37℃水浴1h。⑥ 用洗滌液II洗3次，操作同上。⑦ 加酶標記兔抗鼠Ig復合物：先在加酶標記兔抗鼠Ig復合物管中加0.5mL稀釋液，混勻后全部吸出于3.6mL稀釋液中混勻，每孔加100μL，37℃水浴1h。⑧ 用洗滌液II洗3次，操作同上。⑨ 酶底物反應：每孔（包括第一孔）各加基質液100μL，室溫下避光5～10min，再加入終止液50μL。⑩ 結果判定：以酶標儀在波長492nm下測定吸光度（OD）值：（陰性對照OD值-待測樣本OD值）/陰性對照OD值×100%≥50% 為陽性目測無色或明顯淡于陰性為陽性。結論ELISA與其他技術相比，具有靈敏度高，特異性強，儀器設備要求不高，測定成本低，方法快速、簡便，試劑保存時間較長，自動化程度高，無放射性同位素污染等優(yōu)勢；但同時也存在局限性，比如不能同時分析多種成分，對試劑的選擇性高，對結構類似的化合物有一定程度的交叉反應。所以未來的發(fā)展趨勢就在于開發(fā)高度免疫原性的重組抗原．研究多項標記快速測定方法，將酶體外定向進化應用到檢測中以及研發(fā)種類更多的全自動酶聯(lián)免疫測定儀。這樣將擴大檢測的范圍，提高檢測的穩(wěn)定性，加強標準化，同時也促進了商品化的應用。另外，還應與其他檢測技術如色譜、PcR等結合起來。實現(xiàn)強強聯(lián)合，優(yōu)勢互補。在未來食品安全的快速檢測中發(fā)揮更加突出和重要的作用。
- 觀點2： 3個字 假正經
- 擴展閱讀1：米酒橘子甜湯怎么做好吃
- 適量清水燒開后放入湯圓，湯圓下鍋后勺子輕輕推幾下以免粘鍋。這里煮湯圓的水不宜太多，因為橘子罐頭和米酒里還有一部分糖水。湯圓煮至一個個全部浮在水面時候放入米酒。然后在加入橘子罐頭，再次燒開鍋。最后加入少許淀粉水增加湯的粘稠感。再燒開鍋即可。湯圓可以跟根據自己的口感選擇各種口味的。我最喜...
- 擴展閱讀2：無錫特產有哪些能帶走
- 1、陽山水蜜桃 洋山水蜜桃是無錫著名的土特產。它已經種植了70多年了。洋山桃色澤鮮亮，香氣濃郁，味道香甜多汁。它們在當地被比作“由水構成的血肉”。把美味的陽山桃子帶回家絕對是個不錯的選擇。2、無錫惠山泥人 無錫惠山泥人是無錫惠山古鎮(zhèn)的特產。它可以追溯到南北朝時期，有一千多年的歷史。無錫惠山...
- 擴展閱讀3：在無錫鵝湖玫瑰園旅行有哪些當地特產值得推薦？
- 陽山水蜜桃：陽山是無錫的一個著名水果產區(qū)，尤其以水蜜桃聞名。陽山水蜜桃果肉多汁、甜美可口，是夏季的時令水果，也是無錫的一大特產。太湖白蝦：太湖是中國第三大淡水湖，湖中的白蝦以其肉質鮮嫩、味道鮮美而聞名。太湖白蝦可以做成各種菜肴，也可以購買成干貨作為特產帶走。錫繡：無錫刺繡是中國四大名繡之...
- 擴展閱讀4：做水果披薩有哪些烘烤指南？
- 在搟開的餅底上刷一層薄薄的融化黃油或橄欖油，這有助于防止餅底吸收水果釋放出的水分。選擇水果：選擇新鮮、成熟的水果，這樣披薩的味道會更加鮮美。常用的水果包括草莓、藍莓、香蕉、蘋果、桃子、獼猴桃等。根據個人口味，可以搭配使用不同的水果。但要注意，某些水果（如菠蘿和柑橘類）可能會與乳制品...
- 擴展閱讀5：城市比薩做水果披薩，都放什么水果
- 蘋果，玉米粒，香蕉，獼猴桃等
- 擴展閱讀6：主要做水果的披薩有哪些
- 主要做披薩的水果有榴蓮、菠蘿、蘋果、獼猴桃。材料：面粉200g；牛奶100ml；菠蘿適量 步驟：1、首先準備好做餅皮的原料；2、把鹽和糖加入高粉中；3、牛奶加入40ml的水,稍加熱,加入5g酵母粉,攪勻；4、把步驟三中的酵母水加入面粉混合物中,和成面團；5、黃油隔水融化,倒入面團中,繼續(xù)和面,使面團光滑...
- 擴展閱讀7：水果披薩有哪些
- 一、常見水果披薩種類 榴蓮水果披薩：以榴蓮肉為主要水果配料，味道濃郁甜美。藍莓水果披薩：以新鮮藍莓為主，清新口感，非常適合夏日食用。芒果披薩：芒果的甜與酸與披薩的奶酪完美結合，味道獨特。熱帶水果披薩：包含菠蘿、芒果、木瓜等熱帶水果，口感豐富。二、詳細解釋 水果披薩的特點：水果披薩是一種將...
- 擴展閱讀8：水果披薩放什么水果
- 水果披薩可以放的水果種類很多，常見的有菠蘿、蘋果、香蕉、草莓、櫻桃等。披薩是一種由面團、醬料和各種配料組成的食品，其中水果披薩是一種以水果為配料的特殊披薩。水果披薩中的水果選擇多種多樣，具體可以根據季節(jié)和地域的不同而有所變化。1. 常見水果種類：水果披薩中常用的水果包括菠蘿、蘋果、香蕉等...
- 擴展閱讀9：水果披薩的做法是怎樣的？
- 水果披薩怎么做好吃？水果披薩的家常菜做法有哪些？全在這個視頻里。
- 擴展閱讀10：可口的披薩果味披薩怎么做
- 方便大家快速完成制作任務，解鎖新配方。可口的披薩美味的披薩果味披薩怎么做1、果味披薩就是水果披薩，我們先制作水果披薩，放入任意水果（青椒和橄欖也算水果）2、然后根據任務的要求提示，去完成任務，放置披薩。3、接著制作果味披薩，需要的食材有白面餅+醬料+芝士+鳳梨+橄欖+青椒。
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